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首先請謹記!無(wú)論何時(shí)請按照說(shuō)明書(shū)推薦的保存條件正確保存抗體!
1. 收到抗體后請務(wù)必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長(cháng)離心時(shí)間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來(lái))!
Abcam的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心1-5分鐘才能將附著(zhù)在管壁或蓋內的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì )導致離心不完全,導致出現抗體的量不足的現象!
2. 對于Abcam大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20℃ or -80℃。
o對絕大多數抗體來(lái)說(shuō),保存在-20℃是完全足夠了。沒(méi)有任何證據顯示保存在-80℃會(huì )有更多的好處!
o分裝可以最大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o分裝的量以一次實(shí)驗用完為好,最少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會(huì )受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
o復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來(lái)!
o抗體工作液應該當天配制當天用完,在4℃盡量不要超過(guò)1天。
o絕對避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門(mén)上
3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒(méi)有影響的。
如果抗體很快(1-2周)會(huì )使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要長(cháng)期保存則最好是在-20℃ or -80℃。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據說(shuō)明書(shū)推薦的方式來(lái)正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來(lái)!因為該類(lèi)產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(cháng)期在4oC保存會(huì )導致抗體的降解!
4. 大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過(guò)程需要1-2周的時(shí)間,所以是在4℃的條件下來(lái)完成的。
4℃運輸最主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。所以運輸過(guò)程中絕對避免干冰運輸!
特殊抗體的保存條件:
·酶聯(lián)抗體:永遠保存在4℃,避免凍起來(lái)。否則會(huì )導致酶活性的下降或者喪失
·偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗階段也是要避光操作的!
·IgG3的同型對照:永遠保存在4℃,避免凍起來(lái)。因為如果出現凍融過(guò)程,該抗體非常容易形成多聚體
無(wú)論是保存還是運輸,絕對避免反復凍融!
反復凍融會(huì )導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力!
抗體保存其它相關(guān)信息:
關(guān)于加入甘油保存:
有些人會(huì )加50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復凍融,甘油在-20℃會(huì )降低冰點(diǎn)。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam僅對非常小的一部分抗體檢測過(guò)其在這種條件下的穩定性;而Abcam只對按照推薦條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80℃保存,因為這已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話(huà),請謹慎注意無(wú)菌操作,避免污染!