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Heat-Inactivated 熱滅活處理,即高溫加熱(56℃)30分鐘,以滅活血清中活性蛋白,如抗原抗體結合所需的補體。有些特殊細胞的培養需要血清熱滅活處理。
血清忌諱溫度的驟然變化,溫度的突變會(huì )影響培養效果,最怕冷凍、解凍次數多,這樣會(huì )使沉淀物增多,解凍時(shí),將血清放在冰箱里4℃均勻解凍。若需熱滅活處理,需等血清全部解凍。
實(shí)驗顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì )使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品質(zhì)最高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。